全血总RNA试剂盒(浙杭械备20170220号)关于"为什么全血总RNA试剂盒能正常分相,但提取浓度较低?" 的回答

问题描述:

使用天根血液稳定剂(DP440-02),按血液:稳定剂=13的比例进行稀释,500μl稀释后的样本使用全血总RNA试剂盒能正常分相,但提取浓度较低。

答:

如果能正常分相,可能RNA还是提取到了。由于血液已经经过了3倍的稀释,RNA浓度低可能还是正常的。因为500 μl人血用我们的试剂盒提取到RNA的浓度在50~100ng/μl50 μl洗脱)范围内,那么从1/3体积的血液中提取到RNA的浓度可能会在16~33ng/μl的范围。如果要提高RNA的回收量,比较简单的方法就是平行多做几管500 μl血样(分别按比例加入1ml Buffer L9)提取,然后将离心获得的上清混合乙醇后在一个纯化柱中离心过柱,就可以富集RNA(洗涤步骤不用增加),达到提高RNA浓度的目的。