动物组织总RNA提取方法

作者:新景实验室
版权说明:本文系原创文章 转载请标注出处和本文链接

1、  取新鲜动物组织0.1-0.2g置于组织匀浆器中,加入预冷的细胞裂解液1买来,在水浴中迅速匀浆15-30s,以充分研碎组织。然后将细胞悬浮液吸入另一试管中。

2、  加入2mol醋酸钠(ph4.0120μl,充分混匀。

3、  加入1.2ml酚:氯仿:异丙醇,充分混匀摇振10s,冰浴15min

4、  将混合物转移至1.5mlEP管中,4、离心10000r/min20min

5、  移取上层水相至另一个EP管中,加入等体积的异丙醇,2030min沉淀RNA

6、  4,离心12000r/min15min

7、  弃上清液,加入70%乙醇400ul,洗涤RNA沉淀物被悬浮,则4离心10000r/min10min

8、  弃上清液,自然干燥,但应避免沉淀完全干燥否则RNA难以溶解。

9、  加入100 μlRNase水重悬RNA,或加1ml无水乙醇和1/10体积3mol醋酸钠(ph4.0),-70℃保存。