质粒小提中量试剂盒关于"质粒DNA电泳带型异常" 的回答

问题描述:

质粒DNA电泳带型异常

答:

1) 正常的质粒DNA带型,见图1:

C泳道:空载体pUC19电泳效果。顶部条带1:二聚体质粒DNA;中间条带2:含切口的质粒DNA;下部条带3:超螺旋质粒DNA

A泳道:空载体pUC19单酶切效果。

B泳道:含插入片段的pUC19双酶切效果。

2) 异常的质粒DNA带型,见图2

获得的质粒DNA二聚体含量很高,或者纯化的质粒DNA20℃储存一段时间后二聚体增多(见图2泳道1)。质粒二聚体或者多聚体含量的增多与选择的宿主菌有关,但是质粒二聚体或者多聚体的存在并不影响质粒DNA酶切的电泳带型(见图2泳道2)。用TE溶液(10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0)替代Buffer E或去离子水洗脱质粒DNA后储存于20℃于有助于减少质粒二聚体的产生。