1.0.2-0.5g粪便置于Ep管中(冰水浴),加入1mlPBS,漩涡振荡混匀,200xg离心5min,取上清,冰水浴;2.向沉淀中加入1mlPBS,重复步骤1;3.混合两次上清,用300g离心5min,阅读全文
1. 挑取大肠杆菌菌单菌落,培养至稳定期,取菌液 2.0 mL 于2.0 mL离心管离心得菌体。2. 每管加入 1 mL RNAisol溶液,盖紧管盖,激烈振荡15 s,室温静置5 min 4℃,12000 g,离心 10 min;取上清转阅读全文
一、水煮模板法——主要用于PCR反应1、 接种单菌落于LB或平板中,连续划线,37℃培养18-24小时。2、 刮取1~2接种环菌苔加入150ul三蒸水中,混匀,100℃煮沸10min。3、 12000转/阅读全文
一、基因组DNA提取方法1、贴壁细胞用胰酶消化,离心收集。2、细胞重悬于冰冷的PBS漂洗一次,离心收集。试验步骤2再重新作一边。3、加入5mlDNA提取缓冲液,(10mmol/LTris-cl,0.1mol/LEDTA,0.5%SDS),混阅读全文
1.红细胞裂解液的稀释:根据处理血液样品的体积选取适当体积的10×红细胞裂解液(例如待处理的血液样品体积为200μl,则取140μl10×红细胞裂解液),用RNase-freedd阅读全文
1、取出细胞、收集上清保存备用2、用冷PBS冲洗细胞两次3、加入 1ml RNAisol(24孔板每孔加0.5ml即可),调小刻度用移液器吹打细胞至液体澄清(生化:摇动混匀后室温孵育10min)4、将裂解阅读全文
需要准备的试剂氯仿、异丙醇、75%乙醇(用RNase-free水配制)、RNase-free的水1.匀浆处理(Homogenization)直接阅读全文
方法一:血凝块于室温下自然解冻后,取约1.0cm3的血凝块样本,加入适量生理盐水,浸泡15min,6000r/min离心5min,弃上清。沉淀机械磨碎(勿过度),加入适量提取液(10mmol/LTris2HCL,100mmol/LNaCl,阅读全文
1、细胞悬浮反复冻融3次,3000rpm离心15min,取上清液500ul。2、500ul样品中加入3ul1.5MTris-Cl,20ul 0.5mol/mlEDTA和5.2u1 Np-40。3、加入终浓度为50ug阅读全文
异硫氰酸胍法 取1 g叶片,液氮下充分研磨,迅速转移至离心管,加入3 mL 异硫氰酸胍提取液(4M异硫氰酸胍、2.5 M柠檬酸钠,pH7.0,0.5 %十二烷基肌氨酸钠,0.1 M巯基乙醇) 混匀。再依次加入0.3 mL 2 M NaAc 阅读全文