JM109感受态细胞

产品简介

采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。经pUC19质粒检测，转化效率可达10⁸ cfu/μg。 每支感受态可以酌情分装使用，以降低实验的成本。

JM109菌株介绍

基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi-1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac-proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]。

特点：本菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM109编码的LacZΔM15进行α-互补，从而显示β-半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株。

质量标准 

1. 使用1 ng pUC19 Plasmid转化100 μl JM109感受态细胞测试，产生的菌落数＞1×10⁸ transformants/1 μg pUC19 Plasmid 。

2. β-半乳糖苷酶、α-互补性的确认：JM109感受态细胞使用pUC19 Plasmid转化后，在含有100 μg/ml的Ampicillin、40 μg/ml的X-Gal、120 μg/ml的IPTG的L-琼脂平板培养基上培养，产生蓝色菌落。             

3. 100 μl的JM109感受态细胞在含有100 μg/ml Ampicillin的L-琼脂平板培养基上培养40小时不产生菌落。

用户需自备的试剂与物品

1. 试剂：LB液体与固体培养基、抗生素。

2. 物品：弯头玻棒铺菌器、碎冰、水浴锅、超净工作台、摇床、移液器与无菌吸头、无菌1.5 ml离心管、台式小量离心机（可配1.5 ml离心管和2 ml离心管的转子）。

3. 筛选蓝白斑需要试剂：X-Gal、IPTG。

使用前准备

1. 感受态细胞从﹣70℃以下冰箱取出后立即置于冰上熔化，将水浴锅温度设置为42℃或将相应抗生素平板温育至37℃。

2. 相应抗生素溶液、24 mg/ml的IPTG溶液及20 mg/ml的X-Gal溶液。注意20 mg/ml的X-Gal溶液要避光保存。