TOP10感受态细胞

产品介绍

本公司生产的TOP10感受态细胞是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。经pUC19质粒检测，转化效率可达10⁸ cfu/μg。 每支感受态可以酌情分装使用，以降低实验的成本。

TOP10菌株介绍

基因型：F-，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1，araΔ139Δ(ara-leu)7697，galU/galK，rps，(Str^R) endA1，nupG。

特点：本菌株是一种常用于质粒克隆的菌株。适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。其φ80、lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补，可用于蓝白斑筛选。

质量标准 

1. 使用1 ng pUC19 Plasmid转化100 μl TOP10感受态细胞测试，产生的菌落数＞1×10⁸ transformants/1 μg pUC19 Plasmid 。

2. β-半乳糖苷酶、α-互补性的确认：TOP10感受态细胞使用pUC19 Plasmid转化后，在含有100 μg/ml的Ampicillin、40 μg/ml的X-Gal的L-琼脂平板培养基上培养，产生蓝色菌落。             

3. 100 μl的TOP10感受态细胞在含有100 μg/ml Ampicillin的L-琼脂平板培养基上培养40小时不产生菌落。

用户需自备的试剂与物品

1. 试剂：LB液体与固体培养基、抗生素。

2. 物品：弯头玻棒铺菌器、碎冰、水浴锅、超净工作台、摇床、移液器与无菌吸头、无菌1.5 ml离心管、台式小量离心机（可配1.5 ml离心管和2 ml离心管的转子）。

3. 筛选蓝白斑需要试剂：X-Gal、IPTG。

使用前准备

1. 感受态细胞从﹣70℃以下冰箱取出后立即置于冰上熔化，将水浴锅温度设置为42℃或将相应抗生素平板温育至37℃。

2. 相应抗生素溶液、24 mg/ml的IPTG溶液及20 mg/ml的X-Gal溶液。注意20 mg/ml的X-Gal溶液要避光保存。