> >

E-Taq DNA Polymerase

是Taq与Pfu DNA Polymerase的优化混合酶,具有5’→3’ DNA聚合酶活性、5’→3’外切酶和3’→5’外切酶活性。

Taq DNA Polymerase相比,E-Taq DNA Polymerase具有扩增效率高、错配率低的优良性能,能高效率扩增DNA 片段。使用本品扩增得到的大部分PCR产物3 端附有一个A碱基,可直接用于T/A克隆。本产品适用于常规PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等反应。

序号 规格 价格 购买

8014100 100μl ¥150 立即购买

8014500 500μl ¥600 立即购买

产品储存与有效期

20℃保存有效期为两年以上。

质量控制

   SDS-PAGE检测纯度大于99%。经检测无外源核酸酶活性,PCR方法检测无宿主DNA残留,能有效扩增人类基因组中的单拷贝基因。

PCR体系成分

1. 模板DNA的纯度:很多残留的核酸提取试剂会影响PCR反应,包括蛋白酶、蛋白变性剂(比如SDS、胍盐)、高浓度盐(KAcNaAc、辛酸钠等)和高浓度EDTA等。纯度不高的模板(比如煮沸法获取的模板)用量请勿超过PCR反应体系的1/10(比如50 μl反应体系中加入模板的体积不应超过5 μl)。如果模板DNA纯度太差,可使用新景(SimgenDNA纯化试剂盒(Cat. No.2101050)对模板DNA进行纯化及浓缩。经新景(SimgenDNA纯化试剂盒纯化后的模板使用量可多至PCR反应体系体积的1/2

2.  模板DNA用量:极微量的DNA也可以作为PCR摸板,但为保证反应的稳定性,50 μl体系建议使用104拷贝以上的靶序列作为模板。模板DNA的推荐使用量:

人基因组 DNA0.05 μg~0.5 μg/50 μl PCR反应体系

大肠杆菌基因组 DNA10 ng~100 ng/50 μl PCR反应体系

λ DNA0.5 ng~5 ng/50 μl PCR反应体系

质粒DNA0.1ng ~ 10 ng/50 μl PCR反应体系

如需用扩增产物作为模板再扩增,应至少将扩增产物稀释1,00010,000倍后再作为模板使用,否则可能会出现涂抹条带或无特异性条带。

3. 引物浓度:一般每条引物配制的浓度为10 μM (50×),工作浓度为0.2 μM。引物过量可能会出现非特异性扩增,引物过少则可能会降低扩增效率。