快速质粒DNA小量试剂盒

可能的原因：1、Buffer W2中未加入无水乙醇，应按比例补加无水乙醇。如果是错误地加入了其他试剂，请向我公司技术部寻求帮助。2、 Buffer W2中错误地加入了70%乙醇。请向我公司技术部寻求帮助。3、 细菌培养物中污染有真菌或其他杂菌（！注意：只针对原核生物起作用的抗生素对真菌无效）。确保从新鲜制备的含抗生素的平板中挑取单克隆菌落接种培养。4、质粒未转化到宿主菌中。确保从新鲜制备的含抗生素...... 查看回答 ​

1、细菌沉积在管底，难以用旋涡振荡充分悬浮。如果要收集超过5ml细菌培养物，却仍然使用快速收集菌体（12000 rpm 离心30秒）的方法，可能会导致收集的菌体难以悬浮，此时可尝试用移液器吸头吹打菌体沉淀的方法悬浮细菌；或者改为3000 rpm离心5分钟收集菌体。2、加入Buffer II后，溶液变得非常粘稠，无法流动。通常造成上述原因是细菌用量过多所至，请适当减少细菌用量。3、加入Buffer ...... 查看回答 ​

1、 限制性酶切后电泳质粒消失，没有条带，或者电泳条带出现严重的拖尾现象。可能是选用了野生型的或者是end A+的宿主菌所致，并且未用Buffer W1洗涤纯化柱。请确保用Buffer W1洗涤纯化柱，或者按附录中的方法对质粒DNA作进一步的纯化。2、 酶切不能完全切开。本试剂盒纯化得到的质粒DNA不存在酶切抑制物，可直接用于酶切（比如20 μl酶切体系中，除去2 μl 10×酶切缓冲液和1 μl...... 查看回答 ​

1、正常的质粒DNA带型，见图1:C泳道：空载体pUC19电泳效果。顶部条带1：二聚体质粒DNA；中间条带2：含切口的质粒DNA；下部条带3：超螺旋质粒DNA。A泳道：空载体pUC19单酶切效果。B泳道：含插入片段的pUC19双酶切效果。2、异常的质粒DNA带型，见图2：获得的质粒DNA二聚体含量很高，或者纯化的质粒DNA于﹣20℃储存一段时间后二聚体增多（见图2泳道1）。质粒二聚体或者多聚体含量...... 查看回答 ​

可能的原因：1、Buffer I中所含的RNase A活性降低。如果加入RNase A的Buffer I在2~8℃保存的时间超过6个月的，应再补充RNase A至终浓度100 μg/ml。2、菌液量过多或者细菌本身特性导致RNA含量过多，不能完全被RNase A降解。可以增加Buffer I中RNase A的浓度。冬季环境温度低，会导致RNase A活性降低，可在中和步骤后将中和产物放置到37℃水...... 查看回答 ​

可能的原因：1、溶解步骤操作太剧烈：加入Buffer II后应温和地翻转离心管使细菌溶解。2、溶解步骤停留时间过长：加入Buffer II后静置时间不应超过5分钟。3、中和步骤操作太剧烈：加入Buffer N8(III)后应温和地翻转离心管使溶液中和。4、细菌的培养时间超过16小时，导致部分细菌出现了溶菌现象。5、细菌不是新鲜收集的或者收集好后在冰箱放置时间过久。...... 查看回答 ​

1.快速质粒DNA小量试剂盒说明书中写的是用1-5 ml培养基培养单菌过夜，不能用20 ml培养基提质粒DNA，菌太多会导致难以裂解，影响实验操作和减少质粒得率。在实验操作时，切记按照说明书的步骤来操作，如果按照以往经验或者前辈的方法，结果反而会适得其反。2.因为是挑一个单克隆到5毫升的培养基中培养，每个培养基的生产状况不一样，最后得到的质粒浓度偏差大是正常的。影响质粒提取浓度有很多因素，质粒的拷...... 查看回答 ​